準(zhǔn)備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書                                   1份

普通PCR反應(yīng)流程：

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

反應(yīng)五要素：

奧斯特奧斯特線蟲PCR檢測(cè)試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子*很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

使用方法 ：   

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應(yīng)管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機(jī)

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng)：   

5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書全文。

5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說(shuō)話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽(yáng)性；整個(gè)檢測(cè)過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行，以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí)，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時(shí)禁止激烈振蕩，只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻）。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增，以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度，建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。

薄荷腦 訂購(gòu)|咨詢 雌二(E2) 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

黃杞苷 訂購(gòu)|咨詢 雌三(E3) 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

豆腐果苷 訂購(gòu)|咨詢 雌(E1) 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

常春藤皂苷元 訂購(gòu)|咨詢 雌激素受體α(ERα) 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial

異鼠李素-3-O-葡萄糖苷 黃色粉末 H 訂購(gòu)|咨詢 雌激素受體α(ERα) 規(guī)格： HPLC≥98%；10mg/vial

"酰白藜蘆 42206940 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

白花前胡素 81740070 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

植 14306253 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 25mg

羥  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

DL薄荷 15356704 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

L絲氨  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

青皮  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.3g

羧司坦  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

川燈心草  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 2g

柳穿魚黃素  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

拉米夫定分離度混合物B  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg/支

熔點(diǎn)溫度計(jì)(0120℃)  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 

聚普瑞  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg/瓶

人參蘆頭  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.5g

康唑 86386734 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

1，8二羥蒽醌;1,8Dihydr 117102 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

膽;Cholic acid 81254 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 200mg

重樓皂苷E;Progenin III 19057671 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

蒼術(shù)苷A;Atractyloside A 126054771 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

長(zhǎng)春新;Vincristine 57227 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

貝萼皂苷元;Bayogenin 6989248 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

貝母素;Peimine 23496415 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 967806 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

丙氧脲;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 103055078 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

甜菜;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 13684565 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

氨;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 6607 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

噻酰;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 130000407 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

蚜唑;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 78579 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

四;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 271241146 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

炔丙;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 23031369 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 50mg"

"奧美拉唑酰物 73590586 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 5mg

新 1404042 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 200mg

九里香（千里香）  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 1.5g

奧昔康唑  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

草  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg/支

醋曲德 719713 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

二縮三丙二  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 1ml

定  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

異丙  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 1ml

愛普列特  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 50mg

L羥脯氨 51354 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 50mg

7，4二羥黃 2196147 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 20mg

桑白皮  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 2g

煙酰  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

山梨鉀  訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 100mg

啶脒（吡）;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 135410207 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

保泰松對(duì)照品;有報(bào)告 50339 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 50mg

丙;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 137406 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.1g

a乳糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 5989811 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： 0.25g

櫻草素 15121945 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

蟾精 464744 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

人參皂苷 Rg4 126223287 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

寶藿苷II；大花羊藿苷A；意卡瑞苷A 55395078 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： HPLC≥98%;5mg

Larotaxel 156294369 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬檢測(cè)試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 低溫 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

甘草單鉀鹽 42294031 訂購(gòu)|咨詢  定做種屬