組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

普通PCR反應(yīng)流程：

準備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

使用方法 ：   

1 實驗所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應(yīng)管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項：   

耶氏肺孢子蟲PCR檢測試劑盒5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應(yīng)盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應(yīng)分區(qū)域進行，以避免交叉污染。 5.3 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。

5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

非洲防己堿 訂購|咨詢 P Gamma(Human Peptide Gamma) ELISA Kit  人γ肽 規(guī)格： 10mg

硬飛燕草堿 訂購|咨詢 CA-2(Mouse carbonic anhydrase 2) ELISA KIT  小鼠酶2 規(guī)格： 20mg

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隱丹參 訂購|咨詢 TSP-1 ELISA Kit  大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1 規(guī)格： 20mg

草素 訂購|咨詢 Kim-1(Mouse Kidney injury molecule 1) ELISA KIT  小鼠腎損傷分子1 規(guī)格： 20mg
ANKRD13B  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Porcine apoprotein A1,apo-A1 ELISA Kit進口/分裝

ANKRD20A1  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Porcine apoprotein B100,apo-B100 ELISA Kit特價供應(yīng)

ANKRD20A3  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Porcine lipoprotein α,Lp-α ELISA Kit特價供應(yīng)

ANKRD22  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Porcine adiponectin,ADP ELISA Kit特價促銷

ANKRD32  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Porcine tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit進口/原裝

ANKRD45/CT117  /抗原117規(guī)格:96T/48T英文名稱：swine major histocompatibility complexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠ ELISA Kit進口/分裝

ANKRD50  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：swine major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/SLAⅡ ELISA Kit進口/原裝

ATP6V1G2/V-ATPase G2  氫離子轉(zhuǎn)運ATP合成酶6G抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：swine major histocompatibility complexⅢ,MHCⅢ/SLAⅢ ELISA Kit進口/原裝
反應(yīng)五要素：

耶氏肺孢子蟲PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。