上海一研生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: 生化試劑 ELISA試劑盒, 檢測試劑盒, 免疫組化試劑盒, 分子生物學(xué)試劑盒
鵝螺旋體病PCR檢測試劑盒
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上海市閔行區(qū)
主營產(chǎn)品
反應(yīng)五要素:
鵝螺旋體病PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
鵝螺旋體病PCR檢測試劑盒 | Spirocheta anserinaPCR | 50T |
普通PCR反應(yīng)流程:
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
使用方法 :
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應(yīng)管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項:
5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應(yīng)分區(qū)域進行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。
5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。
5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度,建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。
Mouse Transforming Growth factor β1, TGF-β1 Elisa Kit 奧比沙星 Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ, TNFsR-Ⅰ Elisa Kit 醋酸胸腺肽β4 Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ, TNFsR-Ⅰ Elisa Kit 2-氟-1,3-二甲基氯化咪唑翁六氟磷酸酯(DFIH) Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ, TNFsR-Ⅱ Elisa Kit 抑制素(大鼠) Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ, TNFsR-Ⅱ Elisa Kit 芐索氯銨Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Tumor necrosis factor α, TNF-α Elisa Kit β-淀粉樣蛋白(1-42),大鼠Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Tumor necrosis factor α, TNF-α Elisa Kit 緊張素IMouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Tumor necrosis factor β, TNF-β Elisa Kit 緊張素IIIMouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Tumor necrosis factor β, TNF-β Elisa Kit 蜂毒明肽; 蜂針液明肽Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Collagen Type Ⅳ, Col Ⅳ Elisa Kit枸櫞酸氯米芬,克羅米芬Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Collagen Type Ⅳ, Col Ⅳ Elisa KitML-176;SR-3335Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse Hexokinase, HK Elisa KitSemaxanib(SU-5416 )Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse Hexokinase, HK Elisa Kit米爾貝肟Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse pyruvate dehydrogenase-E1, PDH E1 Elisa Kit伐地考昔Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
Mouse pyruvate dehydrogenase-E1, PDH E1 Elisa Kit胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:96T
Mouse glycogen synthase kinase, GSK Elisa KitUDPGA Na;尿苷-5'-二磷酸葡糖醛酸三鈉鹽Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格:48T
鵝螺旋體病PCR檢測試劑盒CLEC2/CLEC1B C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體 Mouse Troponin I ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
CPLA2 beta 胞漿型磷脂酶A2抗體 Mouse Serum amyloid A ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
C-Mer/MERTK c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗體 Mouse Haptoglobin ELISA KIT 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
phospho-MLF1 Interacting Protein/PBIP1(Thr78) 磷酸化卡波西氏病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 Mouse α1-Acid glycoprotein ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
MRC1/CD206 巨噬細胞甘露糖受體抗體 Mouse Endothelial nitric oxide synthase (eNOS) 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
CLPS 胰輔脂酶抗體 Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
C-Met/Met/HGFR 肝細胞生長因子受體抗體 Mouse cholesterolestertransferprotein ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝
SP17/CT22 表面蛋白Sp17抗體 Mouse angiotensinogen ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝