上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售豬增生性腸炎PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨，我公司供應(yīng)的分子生物學試劑品類齊全，且具有優(yōu)勢價格，歡迎新老客戶咨詢認購。

產(chǎn)品詳細信息

名稱：豬增生性腸炎PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨

規(guī)格： 20T/50T

品牌：上海滬崢

【用途】  用于豬增生性腸炎的檢測、診斷和流行病學調(diào)查

【操作步驟】

1. 病料處理

組織樣品：取適量小腸、回腸，剝離腸粘膜后，于滅菌研缽充分研磨，用PBS以1：3稀釋成均勻乳劑，-20℃反復(fù)凍融3次以上，8000 r/min離心5min，取上清。

2. DNA的抽提

2.1組織樣品：將組織樣品的上清液（或T，T為質(zhì)控樣品）200μl，加50μl SR-I和800μl SR-II，混勻，室溫靜置10min；渦旋，14000g g/min×1min，棄上清液；加入1 mL 70%乙醇，離心14000g /min×1min，棄上清，本操作重復(fù)1次；沉淀中再加入丙酮1mL，離心，14000g/min×1min；沉淀置于56℃干燥15min，加入TU-1 50μl， 離心12000g /min×2min，上清液放入-20℃保存，即為模板。

2.2 糞便樣品：稱取0.2g糞便，懸浮于900μl SR- II中，渦旋并離心，14000g離心1min，室溫靜置1h；吸取上清夜置于含有50μl SR-I的離心管中，室溫靜置10min，渦旋并離心，14000g /min×1 min；加入1 mL 70%乙醇，離心14000g /min×1min，棄上清，本操作重復(fù)1次；沉淀中再加入丙酮1mL，離心，14000g/min×1min；沉淀置于56℃干燥15min，加入TU-1 50μl，離心，12000g/min×2min，上清液放入-20℃保存，即為模板。

3.PCR操作

 3.PCR操作

 4.電泳

 4.電 泳

    稱量0.25g瓊脂糖，放入錐形瓶，加入25mL 1×TAE液（可配置50×濃縮液，儲存?zhèn)溆茫谖⒉t中熔解，加入1μl的TU-9混勻。封閉好電泳槽，加入梳子，倒入瓊脂凝膠，待凝固后，將PCR產(chǎn)物6μl混合1.5μl TU-10，加樣于凝膠孔中，同時在相鄰孔加入3μl TU-11，在100V 電壓下，1×TAE液中電泳20min，在紫外成像儀下觀察結(jié)果。

【結(jié)果判定】 

在295bp 位置出現(xiàn)擴增帶，實驗結(jié)果為陽性

豬增生性腸炎PCR診斷試劑盒

【注意事項】

1. 每次使用，開蓋之前請先瞬時離心，使試劑沉于管底。

2. 所有試劑在要求溫度下保存，-20℃保存試劑盡量減少反復(fù)凍融，使用后的試劑立即放回，避免在室溫擱置太久。

3. 盡量建立PCR試驗操作區(qū)，避免交叉污染。

4. 加樣和反應(yīng)程序嚴格按照說明書進行，由于操作失誤、移液器不精確、定時不準確造成無結(jié)果情況，不予負責。

5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前，要高壓滅菌，操作過程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁，可用鑷子夾取。

6. 注意防止試劑污染，在有效期限前用完。