客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱：牛布魯氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱：Brucella bovis

貨號：BJP63364

分類：熒光定量PCR試劑盒

產(chǎn)品僅用于科研儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法

可進(jìn)行相對，絕對定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

檢測步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14μL N×14μL

酶混合物 1 μL N×1 μL

總量 15 μL N×15μL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

毛殼素 28097-03-2萘哌地爾載脂蛋白B(APOB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

噻吩-2-羧酸乙酯 2810-04-0厄貝沙坦角蛋白18(KRT18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%

噻吩-2-羧酸乙酯 2810-04-0奧硝唑轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)99%

L-脯氨酸叔丁基酯 2812-46-6馬來酸替加色羅肥胖抑制素(OB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

L-脯氨酸叔丁基酯 2812-46-6三苯雙脒載脂蛋白A5(APOA5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

L-脯氨酸叔丁基酯 2812-46-6非那雄胺α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2,6-二氟苯酚 28177-48-2利塞膦酸鈉抑制素βC(INHβC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2，6-二異基苯異酸酯 28178-42-9鹽酸法舒地爾一氧化氮合酶相互作用蛋白(NOSIP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

2，6-二異基苯異酸酯 28178-42-9氯雷他定半乳凝素3(GAL3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

1,3-雙(2,6-二異苯基)-4,5-二氫咪唑四氟酸鹽 282109-83-5巴柳氮鈉半乳凝素3(GAL3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

1,3-雙(2,6-二異苯基)-4,5-二氫咪唑四氟酸鹽 282109-83-53，4，5-三甲氧基苯甲酸轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)97%

2,3,4-三氟苯酚 2822-41-5依帕司他轉(zhuǎn)化生長因子β誘導(dǎo)蛋白(TGFβI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥98%

2,3,4-三氟苯酚 2822-41-5那格列奈凝溶膠蛋白(GS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)≥98%

間溴苯乙 28229-69-8依達(dá)拉奉Ki-67蛋白(Ki67P)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%

間溴苯乙 28229-69-8鹽酸吉西他濱脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)98%
牛布魯氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒鋁片GIMAP7  GTP酶IMAP家族成員7抗體 100 ul

鋁粉GIMAP8  GTP酶IMAP家族成員8抗體 20 ul

鋁絲GPRIN1  G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體 100 ul

鋁屑GPRIN2  G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2抗體 100 ul

三羥基鋁GPRIN3  G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白3抗體 100 ul

鋁氧DIRC2  干擾腎細(xì)胞癌蛋白2抗體 100 ul

活性礬土p400  p400蛋白抗體 1Kit

氧化鋁GDNAJC7  DNAJC7蛋白抗體 100 ul

氧化鋁HVAV1  鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 100 ul

層析氧化鋁DNMBP  動(dòng)力結(jié)合蛋白DNMBP抗體 20 ul

三堿式磷酸鋁DPH2  白喉酰胺生物合成樣蛋白2抗體 100 ul

富鋁紅柱石CRMP5  二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白5抗體 100 ul

銀粉Phospho-CRMP2 (Thr514+Ser518)  磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體 20 ul

銀片/銀CRMP4/DRP3  腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體 100 ul

銀絲phospho-VAV1(Tyr160)  磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 20 ul
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。