柱式凝固血液DNAout

產(chǎn)品及特點 

本產(chǎn)品是在基因凝固血液 DNAOUT（CAT#:71002）基礎(chǔ)上改進(jìn)的柱式升級產(chǎn)品，專門用于從新鮮或凍存的凝固全血(包括人和禽類)中提取基因組 DNA。跟凝固血液 DNAOUT 相比，它具有下列特點:

1. DNA 更加純凈，OD260/280 在 1.8-2.0 之間，可直接用于 PCR、酶切、雜交等。

2. 操作更加簡單快捷，比凝固血液 DNAOUT 快十分鐘以上。

3. 每克新鮮凝固全血 DNA 產(chǎn)量為 20-50 ug DNA。

4. 安全無毒，本試劑盒對人體無毒，無腐蝕性和刺激性氣味。
規(guī)格及成分 成 份 編 號 大紙盒包裝 
柱式凝固血液 DNAOUT溶液 A 71204A 50 mL 71204B 50 mL 71204C 50 mL 離心吸附柱 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL DNA 洗脫液 2.0 111205 10 mL 使用手冊 71204sc 1 份

運輸及保存 常溫運輸和保存，有效期一年。 

自備試劑 氯仿

使用方法 

1. 65℃預(yù)熱溶液 A，待其沉淀溶化后，充分混勻，取 1 mL 到 10 -15 mL 塑料離心管中并將離心管放置于 65℃待用。

2. 稱取凝固血液 0.1-0.5 g，加入到預(yù)熱的溶液 A 中短暫勻漿（必須使用剪切式勻漿機(jī)）。勻漿過程中將產(chǎn)生大量泡沫，屬于正?，F(xiàn)象。注意：如果是干的血塊，用量不要超過 0.2 g，但需將干血塊剪成微小的碎片。也可以將凝固血塊液氮研磨成粉后轉(zhuǎn)移到裝有溶液 A 的離心管中。

3. 將勻漿液置于 65℃水浴保溫 5 分鐘，然后將不超過 0.75 mL 的勻漿液上清轉(zhuǎn)移到新的 1.5 mL 離心管中。注意：盡量不要轉(zhuǎn)移凝固血液碎片。

4. 在上清液中加入等體積的溶液 B，上下顛倒 30 秒充分混勻。

5. 冰浴 5 分鐘。

6. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移到新的 1.5 mL 離心管中。

7. 在上清中加入 0.2 mL 的自備氯仿，震蕩器上充分振蕩 30 秒混勻。

8. 12000-15000 g 室溫離心 3 分鐘，兩相交界面將有白色膜狀物。

9. 將上清液（大約 0.6 mL）小心轉(zhuǎn)移到新的 1.5 mL 離心管中。

10. 在上清液中加入 1.5 倍體積的溶液 C，上下顛倒 30 秒混勻。

11. 分兩次將混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，每次轉(zhuǎn)移后需要 12000-15000 g 離心半分鐘并棄穿透液。

12. 在離心吸附柱中加入 0.7 mL 的通用洗柱液，12000-15000 g 離心半分鐘。

13. 在離心吸附柱中加入 0.3 mL 的通用洗柱液，12000-15000 g 離心半分鐘（此步為第二次洗滌，一般可以省略）。

14. 12000-15000 g 離心半分鐘以去除殘留通用洗柱液。注意：此步不能省略，否則殘留的通用洗柱液會影響 DNA 的后續(xù)反應(yīng)。

15. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一新的離心管中，加入 30-100 uL DNA 洗脫液 2.0，12000-15000 g 離心半分鐘，管底溶液即 DNA 溶液，可立即使用或放冰箱長期保存。