以人B因子免疫BALB/c小鼠的脾細(xì)胞與SP2/O骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得六株(A_2,B_2,B_7,C_9,F_9,F_(10))分泌抗人B因子單克隆抗體(單抗)的雜交瘤細(xì)胞系.用ELISA檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清和小鼠腹水的特異性抗體效價,分別為10~(-2)—10~(-3)和10~(-4)—10~(-5).抗原阻斷試驗(yàn)結(jié)果,說明這些單抗是B因子特異的.經(jīng)取代試驗(yàn)和ACH_(50)試驗(yàn),提示B因子具有耐熱和不耐熱二組抗原決定基.A_2和B_2針對不耐熱抗原決定基,能補(bǔ)體旁路途徑活化;B_7和C_9針對耐熱抗原決定基,不影響補(bǔ)體旁路途徑活化;F_9和F_(10)則既能與耐熱決定基發(fā)生反應(yīng),也具有補(bǔ)體旁路活化的功能.用固相抗原競爭試驗(yàn),分析B因子的抗原表位,發(fā)現(xiàn)6株單抗可識別4個抗原決定基.這些單抗對B因子結(jié)構(gòu)與功能的研究,B因子在補(bǔ)體旁路活化過程中與有關(guān)補(bǔ)體成分之間的相互關(guān)系的研究,都是很有意義的。

腎移植是目前終末期腎功能衰竭患者的重要替代,但是排斥反應(yīng)是器官移植后面臨的重大難題。免疫劑的應(yīng)用雖然降低了急性排斥反應(yīng)的發(fā)生率,但是并沒有明顯改善移植受者的長期生存,這主要是由于非特異性免疫劑的毒副作用所致。減少免疫劑毒副作用的最理想方案是誘導(dǎo)免疫耐受的形成,但是在還無法常規(guī)實(shí)現(xiàn)。所以根據(jù)患者的免疫功能狀態(tài)有針對性地個體化使用免疫劑,既有效防止免疫不足誘發(fā)的排斥反應(yīng)又避免了免疫過度所產(chǎn)生的毒副作用。受者的免疫狀態(tài)是個體化用藥的重要依據(jù),尋找簡便實(shí)用可靠的免疫狀態(tài)監(jiān)測指標(biāo)一直是移植界努力的方向。轉(zhuǎn)移體內(nèi)遲發(fā)超敏反應(yīng)檢測法(Trans vivo delayed type hypersensitivity assay,Trans-vivo DTH)是公認(rèn)的一種可靠的免疫狀態(tài)監(jiān)測方法,但該方法實(shí)驗(yàn)過程涉及到動物(裸鼠),且步驟煩瑣,耗時較長,應(yīng)用受到很大限制,主要應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)研究。目前仍然停留在依據(jù)受者的血肌酐水平和免疫濃度監(jiān)測對免疫劑的用量進(jìn)行經(jīng)驗(yàn)性調(diào)整,使得部分移植耐受患者仍舊長期終身使用較大劑量的免疫劑,在造成毒副作用的同時還導(dǎo)致資源的極大浪費(fèi)。

初步探討血清補(bǔ)體B因子 CFB 與唐氏綜合征(DS)的相關(guān)性.方法 采用雙向電泳-質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)研究策略,分析6例孕DS胎兒母體血清血與正常母體血清的蛋白表達(dá)譜的差別,篩選鑒定差異表達(dá)蛋白.用酶聯(lián)免疫吸附法 (ELISA)檢測11例孕DS胎兒母體血清與11例DS新生兒血清CFB的含量.結(jié)果 6例孕DS胎兒母體血清的全蛋白差異表達(dá)凝膠圖譜上鑒定出29種差異蛋白,其中CFB上調(diào)了較為顯著,上調(diào)了5.73倍,差異具有顯著性 (P<0.05);與正常母體血清相比,孕DS胎兒母體血清CFB含量明顯增高(466.8 ng/mL vs 293.5 ng/mL,P <0.05),而DS新生兒血清CFB水平顯著降低(174.3 ng/mL vs 311.8 ng/mL,P <0.001).結(jié)論 CFB表達(dá)可能與DS存在密切的聯(lián)系.唐氏綜合征患者異常表達(dá)的CFB可能是誘發(fā)其智力低下的因素之一。