小鼠甘油磷酸膽堿 (GPC)ELISA試劑盒

胎盤血管形成障礙被認為是導致子癇前期(preeclampsia,PE)發(fā)病的主要原因之一,但其具體的機制尚不完全清晰。近年來,研究顯示神經病靶酯酶(neuropathy target esterase,NTE)在胎盤發(fā)育中起至關重要的作用,其生理底物磷脂酰膽堿于妊娠小鼠體內,可誘發(fā)、蛋白尿等子癇前期的癥狀,且與胎盤血管形成密切相關,故推測NTE可能參與了子癇前期胎盤血管形成障礙。本研究擬探討NTE在子癇前期中的表達變化及其對人臍靜脈血管內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖、遷移和血管管形形成的影響及其作用機制。方法:1、通過免疫組織化學技術和Western blot方法,檢測NTE蛋白在正常妊娠和子癇前期胎盤組織中的表達變化。2、通過轉染pEGFP-N3-NTE和pGenesil-1-shNTE質粒,在HUVECs中產生NTE過表達或。3、通過MTS實驗,觀察過表達或NTE對HUVECs增殖的影響。4、通過劃痕實驗和Transwell小室法,觀察NTE過表達或后對HUVECs遷移的影響。5、通過體外管形形成實驗,觀察NTE過表達或后對HUVECs血管管形形成的影響。6、通過ELISA方法檢測NTE過表達或后細胞上清液sFlt-1的水平變化。7、通過薄層色譜法和PC檢測試劑盒,觀察NTE過表達或后HUVECs中的磷脂酰膽堿

L-α-甘油磷脂酰膽堿(簡稱GPC)作為一種重要的神經遞質和磷脂前體,可通過各種方式參與人體生物化學代謝,對神經系統(tǒng),生殖系統(tǒng),內分泌系統(tǒng)等均有重要作用,具有提高人類認知能力,抵抗肌肉萎縮,,加快因所引起的腦損傷恢復等功效.GPC作為一種醫(yī)藥保健品及功能性食品,其最可靠的制備方法是天然磷脂(天然來源的磷脂酰膽堿(PC))酯交換脫脂肪?；?但是傳統(tǒng)的無機堿催化酯交換反應過程存在副反應多,乳化現象嚴重,產物分離困難,原料品質要求苛刻,廢水產生量大等缺點.本文利用有機堿催化劑作用條件溫和,易于獲得等優(yōu)點,探索采用其催化天然PC酯交換脫脂肪?；苽銰PC,系統(tǒng)地研究催化劑種類和反應條件,分析反應過程的競爭關系,歸納反應的動力學,熱力學規(guī)律,為工業(yè)應用提供預測反應過程的參考,同時為深入地認識此類反應提供理論支持. 探索將低沸點有機胺用于催化天然PC酯交換脫脂肪?；磻苽銰PC的過程中,篩選出了正丙胺,異丙胺和叔丁胺三種催化活性較高的低沸點胺,系統(tǒng)研究了其催化酯交換制備GPC的工藝條件.叔胺類催化劑的活性較差,且對于同分異構體而言,支鏈胺比直鏈胺的活性高;對于直鏈胺,其催化活性隨碳原子數的增多而降低.在正丙胺,異丙胺和叔丁胺催化酯交換反應制備GPC的過程中表現出基本類似的規(guī)律:當體系中催化劑用量為2.4%,磷脂酰膽

甘油磷脂酰膽堿(gpc)是磷脂酰膽堿(pc)分子上的兩個脂肪酰基完全被水解掉的產物.為得到較純的甘油磷酸膽堿,作者通過粉末磷脂水解獲得gpc混合物,然后從3種離子交換樹脂中篩選出d113樹脂作為分離甘油磷酸膽堿的主要樹脂,研究了其對甘油磷酸膽堿的吸附作用與解吸過程,解吸液通過特定的陰離子交換樹脂的進一步純化,所得產品經過hplc分析,gpc的干基質量分數為97.11%.