北京旭鑫盛科儀器設備有限公司主營：研磨儀,粉碎儀,破碎儀,篩分儀等前處理儀器

以下內(nèi)容是由北京旭鑫盛科有限公司提供，希望對同行業(yè)有所幫助！

每50～100mg 組織加入0.2體積 TRIzol

1.加鋼球1顆,設置研磨儀參數(shù)：12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿

2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方，蓋緊管蓋，手動劇烈震搖15 秒鐘，然后室溫靜置2～3 分鐘。

3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。

4. 小心吸取上層水相（無色）加入到新試管中，同時計算所吸取的水相體積。不必過多吸取，防止吸入DNA和蛋白雜質（中間層，白色）。

5. 加入所吸取水相等體積預冷的異丙淳，蓋緊管蓋，輕輕搖勻。

6. 室溫靜置10 分鐘，待RNA 充分沉淀（為減少RNA 降解，此步驟可省略）。

7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。

8. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），每管加入0.2體積75%乙醇潤洗，蓋緊管蓋，輕輕晃動試管，以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。

9. 將上清棄除（注意別丟棄沉淀），打開管蓋，將RNA 沉淀干燥（室溫揮發(fā)或真空干燥）。注意RNA 沉淀不可完全干燥，否則難以溶解。

10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全，將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進一步實驗，或者-70℃保存。

組織研磨儀功能特點

組織研磨儀的使用方法1、將儀器放置在干燥通風的環(huán)境中，插上電源，觀察儀器控制顯示器是否正常亮燈。打開儀器，測試控制按鈕是否能正常使用，儀器空載運行時是否有異響。

2、將適量樣品和研磨球放入球磨罐中，注意不要裝滿，要預留一定的研磨空間。初次研磨建議保持樣品和研磨球各占球磨罐容積的三分之一。

3、若需要預冷凍，可將裝有樣品的球磨罐放入液氮環(huán)境中冷卻3分鐘以上，然后再裝入儀器進行研磨。使用液氮進行預冷凍時，應做好防護措施，防止被。

4、將球磨罐放入高通量組織球磨儀的夾具內(nèi)，慢慢轉動轉輪，依靠自動中心定位的緊固裝置固定好球磨罐，蓋上蓋子。

組織研磨儀實驗解決的問題

1、儀器研磨相對于手工研磨工作時更省力方便，實驗更安全，研磨速度更快；相比較于手工研磨，一次研磨的樣品量更多，出樣量增加，時間周期縮短；

2、儀器研磨出料顆粒相較于手工研磨更細膩均勻，出料量也有明顯提升；

3、對樣品保護好，提取出的組織成分在數(shù)量和質量上比手工研磨效果更好；

4、不會出現(xiàn)，實驗更省心。