凋亡DNALadder提取試劑盒

貨號：ZK-PL4034

品牌：子科生物ZIKER

描述：

凋亡(apoptosis)細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)凋亡小體，染色質(zhì)斷裂形成許多長度約為n x 180bp (n=1,2,3,4…)的DNA片段，瓊脂糖凝膠電泳顯示為階梯狀凋亡DNA Ladder，是細(xì)胞凋亡晚期無可爭辯的特征。本試劑盒選擇性分離和提取凋亡組織細(xì)胞特有的DNA ladder，快速方便，無需有機抽提，檢測靈敏度極高?？梢詮?/span>2000個凋亡細(xì)胞中檢測到DNA ladder，但靈敏度實際上只受限于DNA凝膠染色如溴化乙錠染色靈敏度。推薦起始標(biāo)本約1-10 x 105 個細(xì)胞，其中應(yīng)含有至少1-2 x104個凋亡細(xì)胞；>2 x104個凋亡細(xì)胞通?？梢垣@得十分清晰的凋亡DNA ladder。據(jù)此，如果細(xì)胞凋亡發(fā)生率為10%，用戶可用六孔板的一個孔(相當(dāng)于一個35 mm培養(yǎng)皿)培養(yǎng)1-10 x 105個細(xì)胞，如果內(nèi)含1-10 x 104個凋亡細(xì)胞，應(yīng)足以獲得清晰的凋亡DNA ladder。

本試劑盒可用于從組織中提取凋亡DNA ladder。但與培養(yǎng)細(xì)胞相比，整體動物組織凋亡細(xì)胞出現(xiàn)的部位不定、規(guī)律性差，取材量和部位是否恰當(dāng)，均顯著影響最終DNA ladder的量。有豐富經(jīng)驗的用戶可以使用本試劑盒從組織提取凋亡DNA ladder。

效果展示：

圖：用凋亡DNA Ladder提取試劑盒(#C1102)從凋亡的HL60細(xì)胞中提取的180 bp Apoptotic DNA ladder。

目前，國內(nèi)和國外大多數(shù)提取凋亡DNA的試劑盒僅僅是提提取細(xì)胞總DNA，包括基因組DNA和凋亡DNA。在隨后進行DNA凝膠電泳檢測何照相時，高豐度的基因組DNA呈現(xiàn)很強的熒光背景，通稱會掩蓋微弱的凋亡DNA Ladder熒光。這種試劑盒成本較低價格便宜，但靈敏度也很低。如果凋亡細(xì)胞數(shù)量不足或者凋亡程度不足，這類試劑盒通稱無法給出清晰的凋亡DNA Ladder從而導(dǎo)致實驗失敗，浪費寶貴的實驗材料及人力物力，實屬得不償失。

為避免上述問題，我們的調(diào)亡DNA Ladder提取試劑盒(#C1102)選擇性地提取凋亡DNA，去除基因組DNA，很少量的凋亡DNA也可以在凝膠中清晰地顯現(xiàn)出來, 因而具有很高的靈敏度。其靈敏度實際上只受限于溴化乙啶-DNA染色靈敏度。只要確實有少量細(xì)胞發(fā)生凋亡即可檢測到凋亡DNA ladder。