基因組DNA污染清除試劑(清除RNA樣品中的DNA污染)

貨號(hào)：ZK-PL4170

品牌：子科生物ZIKER

描述：制備RNA時(shí)基因組DNA污染將會(huì)干擾下游PCR或Northern Blot實(shí)驗(yàn)。用RNase-free的DNase消化DNA也會(huì)導(dǎo)致RNA降解?；蚪MDNA污染清除試劑不含DNA酶，在強(qiáng)烈抑制RNA酶的同時(shí)徹底清除RNA樣品中的DNA和蛋白質(zhì)污染，進(jìn)一步純化RNA。最后通過(guò)乙醇沉淀回收得到的RNA純度極高，完全不影響原有RNA質(zhì)量和下游應(yīng)用。

用途：非酶法清除RNA樣品中的基因組DNA污染。每ml試劑處理～100μg RNA樣品。

組成：50ml 基因組DNA污染清除劑，100次。

儲(chǔ)存：4℃避光儲(chǔ)存 12個(gè)月有效

效果展示：

圖：DNA污染清除試劑效果

新鮮大鼠肌肉組織總RNA的普通瓊脂糖凝膠電泳。

Before：清除前

在提取RNA時(shí)故意吸取較多的含基因組DNA成分，并向最終的RNA樣品中加入少量大鼠基因組DNA。

After：清除后

使用DNA污染清除試劑之后，徹底清除RNA樣品中的污染DNA。

根據(jù)起始RNA溶液的體積，按比例加入所需試劑。以下操作以100μl RNA溶液為例。除非RNA溶液中RNA濃度很低，為方便操作可用高壓滅菌過(guò)的蒸餾水將不足100μl的RNA樣品的體積補(bǔ)充到100 μl。

1. 每100μl RNA溶液加入500μl基因組DNA污染清除試劑。充分混勻，冰育1分鐘。

2. 加入自備的氯仿100μl。充分混勻，冰上孵育1分鐘。

3. 12000rpm低溫離心10分鐘。

4. 取上清約300 μl轉(zhuǎn)移到新管。應(yīng)留下少量上清勿觸動(dòng)含DNA的中間相，否則重新離心。

5. 加2-2.5倍上清體積的無(wú)水乙醇，充分混勻，冰上或-20C孵育20分鐘。如果取出的上清液量較多，此步驟可加入0.6-1倍上清液體積的異丙醇沉淀。

6. 12000rpm低溫離心10分鐘。棄上清。

7. 加500μl 70%乙醇，振蕩洗滌沉淀。12000rpm低溫離心10分鐘。棄盡上清。

8. 敞開(kāi)管口，空氣干燥RNA沉淀。

9. 加入適量自備的蒸餾水或緩沖液溶解RNA沉淀。1% 普通瓊脂糖凝膠電泳檢查RNA。