L半乳糖酸1 4內酯脫氫酶(GalLDH)檢測試劑盒_50管/48樣(之禮生物提供)
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L半乳糖酸1-4內酯脫氫酶(GalLDH)檢測試劑盒-50管-48樣(之禮生物提供)

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品牌 之禮生物
規(guī)格 50管/48樣
測定方法 分光光度法
用途 僅供科研使用
產(chǎn)品包裝 液體盒裝
最小起訂 1盒起訂
供應商 上海之禮生物科技有限公司
保持期 6個月
保存條件 低溫、避光保存
供貨數(shù)量 629
商品介紹
?科研提供 L半乳糖酸1,4內酯脫氫酶(GalLDH)檢測試劑盒_50管/48樣

測定意義:
L-半乳糖途徑是合成AsA的主要途徑。Gal LDH位于線粒體內膜,負責催化植物體內AsA生物合成的最后一步,也是該途徑的關鍵酶之一,對植物體內AsA含量的積累起著至關重要的作用。

測定原理:
Gal LDH催化L-半乳糖內酯還原細胞色素c(Cyt c),還原型Cyt c在550nm有吸收峰;測定還原型Cyt c增加速率,來計算Gal LDH活性。
自備儀器和用品:
臺式離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、可調式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

粗酶液提取:
按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。13000g,4℃離心10min,取上清置冰上待測。

Gal LDH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到550nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴鍋中預熱30 min。
3. 依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL上清液、800μL預熱的試劑二和100μL試劑三,迅速混勻后于550nm比色,記錄10s和130s的吸光值A1和A2,△A = A2﹣A1。

Gal LDH活性計算公式:
(1). 按蛋白濃度計算
Gal LDH活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘還原1nmol Cyt c 為1個酶活單位。
Gal LDH (nmol/min/mg prot) = △A÷ε÷d×V反總×109÷(Cpr×V樣)÷T
=289×△A ÷Cpr
(2). 按樣本質量計算
Gal LDH活性單位定義:25℃中每克樣品每分鐘還原1nmol Cyt c 為1個酶活單位。
Gal LDH (nmol/min/g鮮重) = △A÷ε÷d×V反總×109÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=289×△A ÷W
ε:還原型Cyt c摩爾消光系數(shù),17.3×103L/ mol/cm;d:比色皿光徑(cm),1cm;V反總:反應體系總體積,1mL=0.001 L;109:1mol=1×109nmol;V樣:加入反應體系中上清液體積,100μL=0.1mL;Cpr:上清液蛋白濃度,mg/mL,蛋白質濃度需要另外測定,建議使用本公司蛋白質含量BCA試劑盒;V樣總:加入提取液體積,1mL;W,樣本質量,g;T:反應時間,2min。
注    意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。


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公司名稱 上海之禮生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 夏力 (QQ:2881498548)
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地址 上海市閔行區(qū)
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