概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè)āＭㄟ^(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

蜂房小甲蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

fSulfaguanidine  中文名：磺胺脒  分子式：C7H10N4O2S    脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白 (FABP4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Sulfadiazine  中文名：磺胺嘧啶  分子式：C10H10N4O2S    凋亡相關(guān)因子 (Fas/Apo-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Sulfaclozine  中文名：磺胺氯吡嗪  分子式：C10H9ClN4O2S    凋亡相關(guān)因子配體 (Fas-L)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Sucrose  中文名：  分子式：C12H22O11    胎球蛋白 -A(Fetuin-A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Succinic acid  中文名：  分子式：C4H6O4    脂褐質(zhì)測(cè)試盒   Lipfuscin test box

總0測(cè)定試劑盒   Total  determination kit  Rebeprazole sodium  中文名：雷貝拉唑鈉  分子式：C18H20N3NaO3S 

自然殺傷細(xì)胞   英文名稱：   Natural killer Cells   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   NK  p-Nitrohydrocinnamic acid  中文名：  分子式：C9H9NO4 

紫外線強(qiáng)度指示卡   UV iensity indicator card  Risperidal  中文名：利培酮  分子式：C23H27FN4O2  度：98.0%

轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-β1   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor β1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TGF-β1  Quinocetone  81810-66-4  中文名：喹烯酮  分子式：C18H14N2O3 

轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子-α   英文名稱：   Ttansforming Growth Factor α   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TGF-α  Quinocetone  81810-66-4  中文名：喹烯酮  分子式：C18H14N2O3  度：98.0%

Levamisole hydrochloride  中文名：鹽酸左旋咪唑  分子式：C11H13ClN2S  度：98.0%  豚鼠促卵泡素(FSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Venlafaxine  中文名：文拉法辛  分子式：C17H27NO2  度：98.0%  豚鼠端粒酶elisa試劑盒   豚鼠端粒酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠端粒酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠端粒酶試劑盒、豚鼠端粒酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Venlafaxine hydrochloride  中文名：鹽酸文拉法辛  分子式：C17H28ClNO2  度：98.0%  豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4elisa試劑盒   豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4試劑盒、豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Ondansetron  中文名：昂丹司瓊  分子式：C18H19N3O  度：98.0%  豚鼠促卵泡素elisa試劑盒   豚鼠促卵泡素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠促卵泡素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠促卵泡素試劑盒、豚鼠促卵泡素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Ondansetron hydrochloride  中文名：鹽酸昂丹司瓊  分子式：C18H20ClN3O  度：98.0%  豚鼠表皮生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   豚鼠表皮生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豚鼠表皮生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠表皮生長(zhǎng)因子試劑盒、豚鼠表皮生長(zhǎng)因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

蜂房小甲蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)兔子高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 

兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒、兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  7-Amino-4-methylcoumarin  26093-31-2  中文名：7-氨基-4-甲基香豆素  分子式：C10H9NO2  度：98.0%   

兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒、兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  22252-43-3  中文名：  分子式：C8H10N2O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  7-Acetoxy-4-methylcoumarin  2747/5/9  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4  度：95.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one  中文名：  分子式：C10H10ClNO