概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

長(zhǎng)雙歧桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒廠家1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

fFluorocytosine  中文名：  分子式：C4H4FN3O    豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Flumethasone  中文名：氟米松  分子式：C22H28F2O5    豬可溶性內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2elisa試劑盒   豬可溶性內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬可溶性內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬可溶性內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2試劑盒、豬可溶性內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Flumequine sodium  中文名：氟甲喹鈉  分子式：C14H11FNNaO3    豬抗凝血酶受體elisa試劑盒   豬抗凝血酶受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬抗凝血酶受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬抗凝血酶受體試劑盒、豬抗凝血酶受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Flumequine  中文名：氟甲喹  分子式：C14H12FNO3    豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1αelisa試劑盒   豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒、豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1αeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Fludarabine  中文名：氟達(dá)拉賓  分子式：C10H12FN5O4    豬角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   豬角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒、豬角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

豬β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Terbinafine  中文名：特比萘芬  分子式：C21H25N  度：98.0%

豬α葡萄糖苷酶（α-Glu）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Terbinafine hydrochloride  中文名：鹽酸特比萘芬  分子式：C21H26ClN  度：98.0%

豬α干擾素elisa試劑盒   豬α干擾素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬α干擾素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬α干擾素試劑盒、豬α干擾素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Teriflunomide  中文名：特立氟胺  分子式：C12H9F3N2O2  度：98.0%

豬α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Terbinafine hydrochloride  中文名：鹽酸特比萘芬  分子式：C21H26ClN 

豬α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Terbinafine hydrochloride  78628-80-5  中文名：鹽酸特比萘芬  分子式：C21H26ClN  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

Withaperuvin C  中文名：  分子式：C28H38O7  度：96.5%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶 1   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MMP-1

Otophylloside O  中文名：  分子式：C56H84O20  度：96.5%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶 2   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   MMP-2

Qingyangshengenin 3-O-α-L-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-oleandropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranosyl-(1→4)-β-D-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H84O20  度：92.0%  兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Otophylloside F  中文名：青陽參苷F  分子式：C48H76O16  度：95.0%  兔(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19  度：98.0%  兔補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

長(zhǎng)雙歧桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒廠家突觸核蛋白   英文名稱：   Human α Synucleinα   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   α-SYN  4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  52298-44-9  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺  分子式：C14H16N2O4S  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

頭孢芐   1g  Amprolium hydrochloride  中文名：鹽酸氨丙林  分子式：C14H20Cl2N4  度：98.0%

銅蘭蛋白（CP）檢測(cè)   Glamate detection                 β-Anhydrouzarigenin  3080-20-4  中文名：  分子式：C23H32O3 

銅－ATP酶（Cu-ATPase）測(cè)定試劑盒（比色法）                    Repaglinide ethyl ester  147770-06-7  中文名：  分子式：C29H40N2O4 

銅（Cu）測(cè)定試劑盒（絡(luò)合比色法）  Xanthopurpurin  518-83-2  中文名：1,3-二羥基蒽醌  分子式：C14H8O4  度：97.0%  關(guān)鍵詞：