概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

槍狀肝吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒廠家方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

fSulfamonomethoxine sodium  38006-08-5  中文名：磺胺間甲氧嘧啶鈉  分子式：C11H11N4NaO3S  度：98.0%      小鼠溶菌酶(LZM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Sulfamonomethoxine  1220-83-3  中文名：磺胺間甲氧嘧啶  分子式：C11H12N4O3S  度：98.0%      小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Sulfamethoxazole  723-46-6  中文名：磺胺甲噁唑  分子式：C10H11N3O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Sulfamethazine  57-68-1  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S  度：99.0%      小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Sulfaguanidine  57-67-0  中文名：磺胺脒  分子式：C7H10N4O2S  度：99.0%      小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠脫氫表雄elisa試劑盒   小鼠脫氫表雄試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠脫氫表雄試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠脫氫表雄試劑盒、小鼠脫氫表雄eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  L-Ascorbic acid  50-81-7  中文名：L-抗壞血酸  分子式：C6H8O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠脫氫表雄(DHEA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Griseofulvin  126-07-8  中文名：灰黃霉素  分子式：C17H17ClO6 

小鼠脫酶(ID)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Lomefloxacin hydrochloride  中文名：鹽酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3  度：98.0%

小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Lomefloxacin hydrochloride  中文名：鹽酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3 

小鼠褪黑素(MT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Lithocholic acid  中文名：石膽酸  分子式：C24H40O3  度：98.5%

Ciprofloxacin hydrochloride  93107-08-5  中文名：鹽酸環(huán)丙沙星  分子式：C17H19ClFN3O3    rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 兔子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Lincomycin hydrochloride  859-18-7  中文名：鹽酸林可霉素  分子式：C18H35ClN2O6S    CLIAKitforBeta2-GP1AbIgA(HumanBeta2-Glycoprotein1aibodyIgA)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgA規(guī)格：48T/96T

Diphenhydramine hydrochloride  147-24-0  中文名：鹽酸苯海拉明  分子式：C17H22ClNO    細(xì)菌脂肪酶(LIPASE)活性定性染色試劑盒20次

Lidocaine hydrochloride  73-78-9  中文名：鹽酸利多卡因  分子式：C14H23ClN2O    RabbitEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Levamisole hydrochloride  16595-80-5  中文名：鹽酸左旋咪唑  分子式：C11H13ClN2S    豚鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒 ，英文名： αHSG ELISA Kit

槍狀肝吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒廠家Wright's-GiemsaStainingSolion  3-Amino-3-phenyl-1-propanol  14593-04-5  中文名：3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式：C9H13NO 

Umbelliferone   25g                 4-Aminobenzophenone  中文名：4-氨基二苯甲酮  分子式：C13H11NO 

Tween80   250ml  4-Aminobutyric acid  1956/12/2  中文名：4-氨基丁酸  分子式：C4H9NO2 

TMB   1g                 4-(Phenylthio)benzyl alcohol  中文名：  分子式：C13H12OS 

TMA   500g  4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene  1533-45-5  中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪  分子式：C28H18N2O2