概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè)?。通過(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

衣阿華支原體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  中文名：  分子式：C7H7Cl2N3O2S  度：98.0%  脂蛋白酯酶（LPL）＆肝脂酶（HL）試劑盒   可見(jiàn)分光光度法    50管/24樣

Dabigatran etexilate benzenesulfonate  中文名：苯磺酸達(dá)比加群酯  分子式：C40H47N7O8S  度：98.0%  甘油三酯（TG）含量測(cè)定試劑盒   可見(jiàn)分光光度法    50管/48樣           

4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C8H8N2O4  度：98.0%  酰基轉(zhuǎn)移酶（AAT）測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

Tiagabine hydrochloride  中文名：鹽酸噻加賓  分子式：C20H26ClNO2S2  度：98.0%  脂蛋白酯酶（LPL）＆肝脂酶（HL）測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

Felodipine  中文名：非洛地平  分子式：C18H19Cl2NO4  度：98.0%  甘油三酯（TG）含量測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

兔子脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole  中文名：1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑  分子式：C8H12N2  度：98.0%

兔子透明質(zhì)酸elisa試劑盒   兔子透明質(zhì)酸試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子透明質(zhì)酸試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子透明質(zhì)酸試劑盒、兔子透明質(zhì)酸eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  9-Hydroxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H14O4  度：96.0%

兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene  中文名：9,9-雙(4-羥苯基)芴  分子式：C25H18O2 

兔子髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  9-Methoxy-α-lapachone  35241-80-6  中文名：  分子式：C16H16O4  度：%  關(guān)鍵詞：  梓; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid  54232-58-5  中文名：  分子式：C18H30O3小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methylprednisolone hemisuccinate  中文名：  分子式：C26H34O8 

小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Bortezomib  中文名：硼替佐米  分子式：C19H25BN4O4 

小鼠抑素(mouse Angiostatin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Methylprednisolone acetate  中文名：甲基潑尼松龍醋酸酯  分子式：C24H32O6  度：98.0%

小鼠性血友病因子elisa試劑盒   小鼠性血友病因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠性血友病因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠性血友病因子試劑盒、小鼠性血友病因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Mizolastine  108612-45-9  中文名：咪唑司汀  分子式：C24H25FN6O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methylprednisolone hemisuccinate  2921-57-5  中文名：  分子式：C26H34O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

衣阿華支原體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸Ketoprofen  中文名：酮基布洛芬  分子式：C16H14O3    豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ketoconazole  中文名：酮康唑  分子式：C26H28Cl2N4O4    豬氧化酶(DAO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Jacaranone  中文名：  分子式：C9H10O4    豬端粒酶(TE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ivermectin B1a  中文名：依維菌素  分子式：C48H74O14    豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Ivabradine hydrochloride  中文名：鹽酸伊伐布雷定  分子式：C27H37ClN2O5    豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子試劑盒、豬肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。