概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實驗方法步驟：

鏈霉菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒運輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實驗，進(jìn)行實驗結(jié)果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f兔兒茶酚胺EAelisa試劑盒   兔兒茶酚胺EA試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔兒茶酚胺EA試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔兒茶酚胺EA試劑盒、兔兒茶酚胺EAelisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  4-Chlorodehydromethyltestosterone  2446-23-3  中文名：4-氯去氫甲基睪酮  分子式：C20H27ClO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde  中文名：  分子式：C8H6F2O3  度：98.0%

兔兒茶酚胺(CA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  4-Chloro-6-iodoquinazoline  98556-31-1  中文名：  分子式：C8H4ClIN2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔蛋白激酶A   英文名稱：   Rabbit Protein Kinase A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PKA  4-Hydroxysapriparaquinone  中文名：  分子式：C20H26O4 

兔單核細(xì)胞趨化蛋白-1(rabbit MCP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  41263-74-5  中文名：  分子式：C8H8N2O4

Torososide A  中文名：  分子式：C38H32O15  度：%  兔子TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Floribundone 1  中文名：  分子式：C32H22O10  度：99.0%  兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Rubianthraquinone  中文名：  分子式：C16H12O5  度：98.0%  兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

6-Hydroxyrubiadin  中文名：6-羥基甲基異茜草素  分子式：C15H10O5  度：97.5%  兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒   兔子α2抗纖溶酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子α2抗纖溶酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子α2抗纖溶酶試劑盒、兔子α2抗纖溶酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

1,5,15-Tri-O-methylmorindol  中文名：  分子式：C18H16O6  度：98.0%  兔增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒   兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔增殖細(xì)胞核抗原試劑盒、兔增殖細(xì)胞核抗原elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。小鼠甲狀旁腺激素(PTH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Donepezil hydrochloride  中文名：鹽酸多奈哌齊  分子式：C24H30ClNO3  度：98.0%

小鼠甲狀旁腺激素   英文名稱：   Mouse Parathormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PTH  N-Acetyl-L-tryptophan  1218-34-4  中文名：N-乙酰-L-色氨酸  分子式：C13H14N2O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠甲種胎兒球蛋白elisa試劑盒   小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠甲種胎兒球蛋白試劑盒、小鼠甲種胎兒球蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     Diaveridine  5355-16-8  中文名：敵菌凈  分子式：C13H16N4O2 

小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Donepezil hydrochloride  中文名：鹽酸多奈哌齊  分子式：C24H30ClNO3 

小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  L-Aspartic acid  56-84-8  中文名：L-天門冬氨酸  分子式：C4H7NO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞

鏈霉菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒運輸Erlotinib hydrochloride  183319-69-9  中文名：鹽酸埃羅替尼  分子式：C22H24ClN3O4    兔II型膠原(rabbit Collagen II)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Empagliflozin  864070-44-0  中文名：依帕列凈  分子式：C23H27ClO7    兔II型膠原C端肽(rabbit CTX-II)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan  915095-94-2  中文名：  分子式：C17H16ClIO2    兔D2聚體(rabbit 2-Dimer)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Bortezomib  179324-69-7  中文名：硼替佐米  分子式：C19H25BN4O4    兔II型前膠原C端肽(rabbit PIICP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Cabozantinib  849217-68-1  中文名：卡博替尼  分子式：C28H24FN3O5    兔可溶性破骨細(xì)胞異化因子(rabbit RANKL)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝