概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

木霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒圖片方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f人組酸豐富糖蛋白(HRG)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit  3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  183075-03-8  中文名：  分子式：C10H14O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  中文名：  分子式：C10H14O5  度：98.0%

人組胺elisa試劑盒   人組胺試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人組胺試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人組胺試劑盒、人組胺elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one  1220891-22-4  中文名：  分子式：C10H10O3  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  四氫萘酮; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

人組胺(HIS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  中文名：  分子式：C10H14O5 

人組胺(HIS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  3,4-Didehydrosapriparaquione  142763-37-9  中文名：  分子式：C20H24O3  度：95.0%  關(guān)鍵詞：

Pefloxacin mesylate  70458-95-6  中文名：甲磺酸培氟沙星  分子式：C18H24FN3O6S    兔白介素6(IL-6)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ethopabate  1959/6/3  中文名：乙氧酰胺苯甲酯  分子式：C12H15NO4    兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Nicarbazin  330-95-0  中文名：尼卡巴嗪  分子式：C19H18N6O6    兔白介素1（IL-1）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ketoprofen  22071-15-4  中文名：酮基布洛芬  分子式：C16H14O3    兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Phenformin hydrochloride  834-28-6  中文名：鹽酸苯乙雙胍  分子式：C10H16ClN5    兔白介素-1a(rabbit IL-1a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Naftifine hydrochloride  65473-14-5  中文名：鹽酸萘替芬  分子式：C21H22ClN  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  N,N-dimethyl-2-Quinoxalinamine  35552-76-2  中文名：  分子式：C10H11N3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白elisa試劑盒   小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白試劑盒、小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Ethyl β-D-xylopyranoside  6743-62-0  中文名：  分子式：C7H14O5 

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D   英文名稱：   Mouse Pulmonary surfacta associated protein type D   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   SP-D  Benzyl cinnamate  中文名：肉桂酸苯甲酯  分子式：C16H14O2  度：98.0%

小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dabigatran etexilate benzenesulfonate  中文名：苯磺酸達(dá)比加群酯  分子式：C40H47N7O8S  度：98.0%

木霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒圖片Diclazuril  中文名：地克珠利  分子式：C17H9Cl3N4O2  度：99.0%  小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Toltrazuril  中文名：托曲珠利  分子式：C18H14F3N3O4S  度：98.0%  小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Paroxetine hydrochloride  中文名：鹽酸帕羅西汀  分子式：C19H21ClFNO3  度：99.0%  小鼠低氧誘導(dǎo)因子elisa試劑盒   小鼠低氧誘導(dǎo)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠低氧誘導(dǎo)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠低氧誘導(dǎo)因子試劑盒、小鼠低氧誘導(dǎo)因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Temozolomide  中文名：替莫唑胺  分子式：C6H6N6O2  度：99.0%  小鼠低密度脂蛋白復(fù)合物elisa試劑盒   小鼠低密度脂蛋白復(fù)合物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠低密度脂蛋白復(fù)合物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠低密度脂蛋白復(fù)合物試劑盒、小鼠低密度脂蛋白復(fù)合物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Pyrimethamine  中文名：乙胺嘧啶  分子式：C12H13ClN4  度：99.0%  小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)elisa試劑盒   小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)試劑盒、小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。