凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

參數(shù)規(guī)格：
人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞【HumanBrain:NormalNerveAstrocytesCells】
產(chǎn)品描述：人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞分離自正常人腦組織，主要功能：（1）神經(jīng)膠質(zhì)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中產(chǎn)生。（2）當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞。（3）膠質(zhì)細(xì)胞能在II類組織相容性復(fù)合體表達CD-4陽性Ｔ細(xì)胞時表達抗原，能進行Fc介導(dǎo)的巨噬作用，并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。公司提供的人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanBrainPrimaCell:NormalNerveAstrocytesCellsCatNo.3-0505)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞傳12代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

實驗要點及說明 ：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4阿扎那韋Atazanavir質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%

T-47D細(xì)胞，管癌細(xì)胞 人食管癌細(xì)胞,EC871214細(xì)胞 大鼠骨肉瘤細(xì)胞;UMR-106阿卡地新(AICAR)Acadesine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1蒲公英萜醇；蒲公英賽醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Taraxerol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 琥珀酸普卡必利Prucalopride Succinate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人肺成纖維細(xì)胞;HFL1鹽酸納洛酮Naloxone HCl dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,二水合物,1類受體拮抗劑
胰凝乳蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL鹽酸阿糖胞苷1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

BEL-7404人肝癌細(xì)胞 BEL-7404 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS鹽酸阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白鹽酸馬尼地平Manidipine Dihydrochlorid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAEC) ( 5×105 ) rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞 Rattus鹽酸馬尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)Manidipine Dihydrochlorid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98,標(biāo)準(zhǔn)品

雪羊皮膚細(xì)胞;SSHS1二氫睪酮,雄諾龍Stanolone/Androstanolone質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR
CLEC4D Others Human 人 CLEC4D / CLECSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢地嗪鈉質(zhì)量規(guī)格：>90%,BRCefodizime

人心臟成纖維細(xì)胞裂解物HCFL頭孢地尼質(zhì)量規(guī)格：>92%,BRCefdinir

C7 Others Human 人 C7 / Compleme compone 7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Boc-D-谷氨酰胺質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BRBoc-D-Glutamine

人腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL赤霉素A4+7質(zhì)量規(guī)格：>90%,BRGibberllin A4+7

MES-13細(xì)胞，小鼠腎小球系膜細(xì)胞 K562(慢性髓原白血病) 豚鼠肺細(xì)胞;GP-F13,3'-二氨基二苯甲酮(>95.0%(GC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)(T)3,3'-Diaminobenzophenone
人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸，英文名或英文縮寫： acetate tetrahydrate，級別：CP，規(guī)格：25克

貂源細(xì)胞硅醋鋁 cncuxitq;cndclusitq 130-93-8

APOA1 Others Mouse 小鼠 APOA1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-天冬素，英文名或英文縮寫：DL- Asparaning H2O，級別：BR，99%，規(guī)格：25克

透明質(zhì)酸酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL無水溴化鋅，英文名或英文縮寫：Zinc bromide，級別：超，規(guī)格：250毫升

CHO-K1-EGFP(CMV-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)倉鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) hamster ovary cell subline F-12K+10% Hyclone FBS(親合素)
收到人神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞如何處理？
1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。