細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大鼠嗅鞘細胞【RatBrain:NormalOlfactoryBulbEnsheathingCells】
產(chǎn)品描述：大鼠嗅鞘細胞是分布于嗅神經(jīng)纖維層，嗅神經(jīng)和嗅黏膜內(nèi)的一種介于雪旺式細胞和星形膠質(zhì)細胞之間的一種獨特的膠質(zhì)細胞。嗅鞘細胞作為位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)移行區(qū)的一種特殊膠質(zhì)細胞可以分泌多種神經(jīng)營養(yǎng)因子來支持神經(jīng)元的存活和發(fā)育。在神經(jīng)損傷后，嗅鞘細胞還能抑制炎性因子分泌，促進神經(jīng)細胞軸突再生的作用。公司提供的大鼠嗅鞘細胞，采用胰酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠嗅鞘細胞培養(yǎng)試劑盒(RatBrainPrimaCell:NormalOlfactoryBulbEnsheathingCellsCatNo.3-7456)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，大鼠嗅鞘細胞傳3代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的大鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
注意事項：
1. 接收到大鼠嗅鞘細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
產(chǎn)品僅供科研使用5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人肺動脈成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL5-氟尿嘧啶核苷5-Fluorouridine

M619細胞，人侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細胞 產(chǎn)氣莢膜梭菌 人T細胞白血病細胞;HuT 785-氟二氫嘧啶-2,4-二酮5-Fluorodihydropyrimidine-2,4-dione

ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白 (His 標簽)1,3,5-三(溴甲基)苯(>98.0%(GC))1,3,5-Tris(bromomethyl)benzene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)

hqxcfluorophosphctq 148893-10-1

CL-0279WL1(大鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2鈰shēng huà shì jì容量：100克

綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞;MGC803-GFP 大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細胞完全培養(yǎng)基 100mLMIO培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT100克

L1210 小鼠白血病細胞626-34-63-基乙酯etxyl 3-AMINOCROTONATE
大鼠嗅鞘細胞WPMY-1(人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞) 5×106cells/瓶×2 C2C12, 小鼠肌原細胞Zincgluconate(T-4)-雙(D-葡萄糖酸-κO1,κO2)-鋅5UBR，98%

CM-R065大鼠腎上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL1-己炔, 98+% 1-Hqxynq 693-0-7

CD302 Others Rat 大鼠 CD302 / CLEC13A 人細胞裂解液 (陽性對照) V-P半固體瓊脂shēng huà shì jì容量：RT10克

大鼠小膠質(zhì)細胞RMTMAB溴化四甲基100克AR，99%

JEG-3細胞，人絨癌細胞 小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞,DCS細胞 人冠狀動脈內(nèi)皮細胞HCAEC164670-44-44-基4-PYRIDYLTHIOUREA