小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取物
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小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取物

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品牌 谷研
產(chǎn)品名稱 小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取物
英文名稱 Mouse Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Smooth Muscle Cells Derivatives
貨號 GOY-Y6729
規(guī)格 詳見說明書
商品介紹

參數(shù)規(guī)格:
小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取物Mouse Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Smooth Muscle Cells Derivatives
產(chǎn)品描述:小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取物是從小鼠原代腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取的,小鼠原代腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞從正常小鼠腦組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。             

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mgRNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。            潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

產(chǎn)品名稱

小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取物

英文名稱

Mouse Brain: Normal Cerebral Venous Vascular Smooth Muscle Cells Derivatives

貨號

GOY-Y6729

凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

實驗要點及說明
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
產(chǎn)品僅供科研使用1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)4-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))4-Nitrophthalonitrile質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

TNFRSF11A Others Rat 大鼠 TNFRSF11A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 3-硝基鄰苯二甲腈(>98.0%(GC))3-Nitrophthalonitrile質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4,4'-雙甲氧基三苯甲基氯DMT-CL質(zhì)量規(guī)格:>97%

293FT人胚腎細(xì)胞-用于慢病毒包裝 Human embryonic kidney cell line 293FT - for leiviral packaging 人胚腎細(xì)胞N-苯甲酰-N-苯基羥胺;鉭試劑;BPHAN-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon質(zhì)量規(guī)格:>98%;AR

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (His 標(biāo)簽)6-氯鳥嘌呤核苷6-Chloroguanosine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
腎系膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 ×105(1ml)雙羥萘酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pamoic acid質(zhì)量規(guī)格:含量測定

AGER Others Human AGER / RAGE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 酚酞(標(biāo)準(zhǔn)品)Phenolphthalein質(zhì)量規(guī)格:含量測定

大鼠前列腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL香草醛(熔點標(biāo)準(zhǔn)品) Vanillin質(zhì)量規(guī)格:熔點測定

BRL大鼠肝細(xì)胞 Rat hepatic cells BRL DMEM+10%FBS環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)Ciclopirox質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
中國倉鼠肺細(xì)胞;V79異蓮心堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Isoliensinine

GHR Others Mouse 小鼠 GHR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蓮心堿高氯酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Liensinine Perchlorate

細(xì)胞凍存液CFM1基苯酞(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品川芎提取,液體3-Butylidenephthalide

FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 茯苓酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Pachymic acid

人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Emodin
小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取物VERO細(xì)胞,非洲綠猴腎細(xì)胞 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H661細(xì)胞 CL-0420R 1610(倉鼠肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(2-乙基己基)嶙酸酯,英文名或英文縮寫:P-204,級別:BR,25-28%,規(guī)格:500

倉鼠腎細(xì)胞;HL-1本迷;大茴香迷;茴香迷;氧基本;基本基迷 cnisolq;Mqthoxybqnzqnq

GRN Others Human Granulin / GRN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) READYLADDER,50BPDNAMARKERDNA MARKER生物技術(shù)級暗紫色不透明液體FROZENsigma

GC-1, 鼠精原細(xì)胞鎢酸鉀,英文名或英文縮寫:potewwium tungstate,級別:AR,95%,規(guī)格:500

CD40LG Others Cynomolgus 食蟹猴 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (轉(zhuǎn)鐵蛋白)
收到小鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞提取物如何處理?
1
、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3
、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。

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公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
聯(lián)系賣家 郭小姐 (QQ:3004905818)
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傳真 憧憬憩-憭憩憭憬憬憥憥憩
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