使用方法:

一、匙形古柏線蟲LAMP試劑盒50次稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。

三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。

產(chǎn)品名稱：匙形古柏線蟲LAMP試劑盒50次

英文名稱：Lamp kit for Cercospora sylvestris

產(chǎn)品貨號：GOY6675

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。

運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

PCR反應五要素：

參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

引物： 引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。

設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3’端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。 

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點，被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點，這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 

下列是匙形古柏線蟲LAMP試劑盒50次的相關產(chǎn)品：
正醇 for HPLC，≥99.7% (GC) 碘腺原氨脫碘酶Ⅲ(DIO3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

正醇 農(nóng)殘級離子ATP酶溶酶體輔助蛋白2(ATP6AP2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

環(huán)己烷 農(nóng)殘級芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子(ARNT)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

環(huán)己烷  ACS, ≥99%白細胞衍生趨化因子2(LECT2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

1,4-環(huán)己烷二羧(cis + trans) 99%α誘導蛋白2(TNFαIP2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

環(huán)烷 for HPLC，農(nóng)殘級，≥75% (GC)環(huán)腺苷二核糖水解酶(cADPRH)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

雙丙酮丙烯酰胺 99%Klothoβ蛋白(KLβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

1,4-二胺 98%脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅱ(P4Hα2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

1,4-二氧六環(huán) HPLC, ≥99.5%N-myc下游調(diào)節(jié)基因2(NDRG2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

1,4-二氧六環(huán) 農(nóng)殘級骨橋素(OPN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

異辛烷 農(nóng)殘級，>99.5% (GC)70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

正烷 農(nóng)殘級Ⅲ型膠原α1(COL3α1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

紅鋁溶液 70 wt%苯溶液補體應答基因32(RGC32)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

間苯二-5-磺鈉（5-SSIPA） 98%角蛋白9(KRT9)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

2,2,4-三基-1,3-二醇二異酯 98.5%松弛肽(RLN)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
匙形古柏線蟲LAMP試劑盒50次視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細胞，HEMEC細胞Pulmonary surfatcant-associated protein D細胞株96T進口/國產(chǎn)原裝、分裝進口、國產(chǎn)200mgCAS號：染色液(Reticulocyte Stain)85316-98-984687-42-396T疑似陽離子ATP酶 13A2(ATP13A2)Polyclonal AntibodyHPLC≥98%鎖鏈素檢測試盒20mgSP-D61840-62-8高端化學試尿溶蛋白1A(UPK1A)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)進口/國產(chǎn)原裝、分裝進口、國產(chǎn)10mgCAS號：染色液(Reticulocyte Stain)6284-40-817429-69-596T醛酮還原酶家族1成員C4(AKR1C4)Polyclonal AntibodyUV≥98%羧基賴氨檢測試盒20mgPARC;CCL1861374-06-9高端化學試犁鼻1受體1(VN1R1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)84687-42-396T疑似陽離子ATP酶 13A2(ATP13A2)Polyclonal Antibody 
技術保護點:

一種用于檢測螺旋體的LAMP引物組，其特征在于，包括一對外引物和一對內(nèi)引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述內(nèi)引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內(nèi)引物和反向內(nèi)引物。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于及其他非科研用途！