山東富舜新材料科技有限公司座落在美麗的“泉城”濟(jì)南。公司是集化學(xué)科研、開發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)為一體的綜合型企業(yè)。我公司擁有先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)備，完善的產(chǎn)品檢測手段和質(zhì)量保證體系。我公司的員工具有較強(qiáng)的責(zé)任感。經(jīng)過多年的發(fā)展，現(xiàn)已形成添加劑、阻燃劑、和化工助劑三大類上百個品種。公司本著“誠信經(jīng)營、專注品質(zhì)”的宗旨，參與到激烈的市場競爭中來，以好的產(chǎn)品質(zhì)量，優(yōu)惠的產(chǎn)品價格，令人滿意的銷售服務(wù)，贏得大家的支持與信賴。山東富舜新材料科技有限公司的誠信、實力和產(chǎn)品質(zhì)量獲得業(yè)界的認(rèn)可。歡迎各界朋友蒞臨參觀、指導(dǎo)和業(yè)務(wù)洽談。

考馬斯亮藍(lán)g-250染色法測定蛋白質(zhì)含量與其他方法相比有什么優(yōu)缺點

    蛋白質(zhì)的存在影響酸堿滴定中所用某些指示劑的顏色變化，從而改變這些染料的光吸收。在些基礎(chǔ)上發(fā)展了蛋白質(zhì)染色測定方法。涉及的指示劑有甲ji橙、考馬斯亮藍(lán)、xiu甲fen綠和xiu  jia酚紫。目前廣泛使用的染料是考馬斯亮藍(lán)。

    考馬斯亮藍(lán)G-250在酸性溶液中為棕紅色，當(dāng)它與蛋白質(zhì)通過范德華鍵結(jié)合后，變?yōu)樗{(lán)色，且在蛋白質(zhì)一定濃度范圍內(nèi)符合比爾定律，可在595nm處比色測定。2—5分鐘即呈最da光吸收，至少穩(wěn)定1小時。在0.01—1.0 mg蛋白質(zhì)/ml范圍內(nèi)均可。該法操作簡便迅速，消耗樣品量少，但不同蛋白質(zhì)之間差異大，且標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差。高濃度的Tris、EDTA、尿素、甘油、蔗糖、bing酮、硫酸銨和去污劑時測定有干擾。緩沖液濃度過高時，改變測定液pH值會影響顯色。考馬斯亮藍(lán)染色能力強(qiáng)，比色杯不洗干凈會影響光吸收值，不可用石英懷測定

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本考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(Commassie Blue Staining Kit)采用了最經(jīng)典的考馬斯亮藍(lán)染色和脫色方法，以考馬斯亮藍(lán)R250為染料，可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳凝膠的常規(guī)染色和脫色，或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測。

  使用本試劑盒，采用常規(guī)染色脫色方法累計時間達(dá)到2-3小時后可以觀察到蛋白條帶；采用快速染色脫色方法20分鐘左右即可觀察到蛋白條帶。觀察到最清晰的蛋白條帶則需染色脫色更長時間。

  本試劑盒中的染色液和脫色液經(jīng)過改良，不含有毒的jia醇，但含有刺激性氣味的yi酸。

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考馬斯亮藍(lán)染色 使用說明：

1. 常規(guī)染色脫色方法：

a. 電泳結(jié)束后，取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。

  b. 置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動，室溫染色1小時或更長時間。 注：具體的染色時間取決于凝膠的厚度和染色時的溫度。凝膠較厚，溫度較低，則染色時間宜適當(dāng)延長。凝膠較薄，溫度較高，則染色時間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近，在染色液中幾乎看不清凝膠時，可以認(rèn)為已染色充分。染色2-4個小時或更長時間不會對最終的染色效果產(chǎn)生fu面影響。

  c. 倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。 

d. 加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液，確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。

e. 置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動，室溫脫色4-24小時。期間更換脫色液2-4次，直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去，并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1-2小時后即可出現(xiàn)。 注：脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙，可以使部分染料吸附在吸水紙上，加快脫色。脫色時間過長也會導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。

f． 完成脫色后，可以把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲，可以把膠保 存在含20%甘油的水中。長期保存可以制備干膠。

 2. 快速染色脫色方法：

  a. 電泳結(jié)束后，取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中，微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。通常對于膠濃度大于10％的膠比較堅韌，在發(fā)生煮沸時不易破損；對于膠濃度小于10%的膠，宜盡量避免煮沸，以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。

  b. 隨后在染色液溫度較高的情況下，在室溫?fù)u床上搖動5-10分鐘。

c. 倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。

d. 加入適量考馬斯亮藍(lán)染色脫色液，確保染色液可以充分覆蓋凝膠。

e. 微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰，立即停止加熱。

f. 隨后在脫色液溫度較高的情況下，在搖床上搖動5-10分鐘。此時通?？梢杂^察到比較清楚的蛋白條帶。

g. 更換新鮮的脫色液，重復(fù)步驟e和步驟f，直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去，蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。