武漢思特進科技發(fā)展有限公司主營：動植物,細菌,細胞生物實驗
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SSC=150mMNaCl,15mM檸檬酸鈉溶液(pH7.4)

HCl處理：對樣本進行20-30min的200mMHCl處理，可將蛋白抽提，并將核酸序列進行一定程度的水解，增加雜交檢測的信噪比。

去垢劑處理：如果對樣品的固定、脫水、包埋等預處理過程不足以將脂膜成分破壞暴露核酸，可對樣品進行額外的蛋白去垢劑處理(如TritonX-100和SDS)。

蛋白酶處理：樣品中待雜交的核酸序列常與蛋白纏繞交聯(lián)在一起，樣品的固定步驟更是加劇了蛋白的交聯(lián)程度，因此預滲透是核酸雜交前的常規(guī)步驟，通常通過蛋白酶K的消化作用來完成。根據(jù)不同的文獻來源，蛋白酶K的工作濃度通常設為10-500μg/ml(溶解于20mMTris-HCl,2mMCaCl2,pH7.4,酶濃度可根據(jù)具體樣品進一步優(yōu)化)，對樣品進行37°C7.5–30min的處理。染色體涂片或核片的蛋白酶K處理濃度可降至1μg/ml消化7.5min。也有文獻指出，固定石蠟包埋的組織切片樣品，使用胃蛋白酶（500μg/ml，溶于200mMHCl）將得到較好的蛋白消化結果。

它是伴隨著生物醫(yī)學科學，通過漫長的動物實驗過程形成的。但是，實驗動物科學的迅速發(fā)展，使得實驗動物的研究價值已經(jīng)不于生物科學方面，而且廣泛地與許多領域科學實驗研究緊緊地聯(lián)系在一起，成為保證現(xiàn)代科學實驗研究的一個的條件。在很多領域的科學研究中，實驗動物充當著非常重要的安全試驗，效果試驗、標準試驗的角色。

肝纖維化動物模型特點：

①肝纖維化出現(xiàn)早，出現(xiàn)率高；

②動物整體損傷輕微，毛發(fā)、生長情況正常；

③纖維化組織中大量膠原，Ⅲ、Ⅳ型前膠原mRNA增多。

慢性活動性患者循環(huán)復合物多為陽性，豬模型可用于慢性所致肝纖維化的研究，對于研究復合物的形成，沉積和清除及對于防治損傷性肝纖維化有效的篩選，具有意義。

（IDA）發(fā)生的主要原因是由于鐵的攝入不足和/或鐵丟失過多，引起機體血紅蛋白合成障礙導

致。IDA模型有大鼠、小鼠、兔、雞、貓、狗、猴等，其中以大鼠為常用。

動物模型方法：

1. 給予低鐵飲食。飼料含鐵量≥50mg/kg能滿足大鼠的基本需要，低鐵飼料的鐵含量≤10mg/kg，標準飼

料鐵含量為220-270mg/kg。飼料配方以酪蛋白或脫脂奶粉作為蛋白來源，玉米淀粉或蔗糖作為碳水化合物來源，加入植物油，混合維生素和混合無機鹽配制。

近來通過絡合劑1%EDTA-2Na除去國產(chǎn)飼料中的鐵，取得滿意的實驗結果。

2. 給動物逐次少量放血，造成鐵的慢性丟失。通常采用剪尾的方法，一方面放血不但引起鐵的丟失，而且還可以引起其它營養(yǎng)素的丟失；另一方面剪尾易

引起動物而。

3. 低鐵飲食輔以定期少量放血。